Caracterização da atividade enzimática da invertase obtida através da Saccharomyces cerevisiae

Resumo

Enzimas são proteínas capazes de acelerar os processos químicos com grandes vantagens, frente aos catalisadores químicos, principalmente por serem ecologicamente mais viáveis, entretanto, alguns fatores podem afetar a reação. Entre estes fatores a concentração de enzima, pois quanto mais enzima houver em um meio reacional mais rapidamente ocorrerá, mas existe uma concentração máxima de enzima que se consegue adicionar ao meio, dependendo da concentração de substrato presente e da atividade enzimática para a temperatura e pH no qual o meio reacional se encontra, aumentando a velocidade da reação. Além disso, toda enzima possui uma temperatura e um pH ótimo, na qual a velocidade da reação atinge seu valor máximo, ou seja, a atividade nesse ponto é máxima, valores excessivos têm efeitos desfavoráveis nas estruturas das enzimas, podendo ocasionar desnaturação, sendo este diferente para cada enzima. É neste sentido, que o presente trabalho visa caracterizar a atividade enzimática da invertase obtida através da levedura Saccharomyces cerevisiae em relação ao pH, temperatura e concentração de sacarose, além da determinação do seu ponto isoelétrico (pI). A metodologia proposta se baseia na obtenção da invertase segundo Chaplin e Bucke, na quantificação de açúcares redutores liberados pelo método do ácido dinitrosalicílico (DNS) e de forma análoga, foram determinadas a atividade enzimática em diferentes pH, temperatura e concentrações de substrato, a fim de se caracterizar os valores ótimos da atividade enzimática e determinar o pI. Os resultados obtidos demonstram que, as condições de pH 5,5 e temperatura de 55°C são favoráveis para a atividade da invertase, e o comportamento de saturação de 0,2 mg/mL, observado reforça a validade do modelo de Michaelis-Menten para descrever a hidrólise da sacarose por esta enzima, sendo seu pI 4,0. Estes resultados são essenciais para a otimização de processos biotecnológicos e industriais que dependem da conversão eficiente da sacarose.